CAS: 632-69-9 | 分子式: C20H5Cl4I4NaO5 | 分子量: 998 | EINECS号: 211-183-3 |
溶解度
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H2O: soluble1mg/mL
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形态
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Solid
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酸度系数(pKa)
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3.9, 4.7(at 25℃)
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颜色
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Red-brown
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水溶解性
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soluble
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最大波长(λmax)
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548 nm
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BRN
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3645857
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生物领域应用
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Apoptosis assay; diagnosis of diseases related to amyloid accumulation; controlling plant diseases; identifying fungi; treating skin,mouth,digestive tract,urinary tract,reproductive tract,respiratory tract,circulatory system
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EPA化学物质信息
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危险品标志
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安全说明
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危险品运输编号
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UN 3264 8 / PGIII
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F
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危险性描述
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海关编码
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32129000
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化学性质 |
重组人TNFα对pH和热均有一定的耐受性。在pH 6-10,4℃条件下,24h后仍有活性;60℃时,1h后仍有活性。大肠杆菌生产的TNFβ是非糖基化蛋白,在变性条件下容易凝聚,对胰蛋白酶、糜蛋白酶等酶类不敏感,对热不稳定,75℃失活,但其生化特性与天然TNFβ相似。
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生产方法 |
方法一、重组TNFα的工艺过程
细菌发酵 将工程菌接种于LB培养基,37℃震荡培养至A600nm=1,转至M9培养基,于42℃诱导4h。离心,收集菌体。用pH为8的磷酸盐缓冲液(PB,10mmol/L)悬浮菌体,并用超声破碎菌体,离心收集上清液,对PB透析,得TNFα粗品。 工程菌[培养、发酵]→[37℃、42℃]发酵菌体[10mmol/L PB]→[pH8]TNFα粗品 DEAE-Sepharose FF 离子交换柱层析 离子交换柱用PB平衡,加TNFα粗品,用PB洗柱,再加75 mmol/L NaCl洗脱,收集各峰,测TNFα活性。 TNFα粗品[DEAE-Sepharose FF离子柱]→[75 mmol/L NaCl]TNFα活性组分I Q-Sepharose FF离子交换柱层析 离子交换柱用pH 8、20 mmol/LTris-HCl缓冲液平衡,然后加TNFα活性组分I,用80 mmol/L NaCl洗脱,收集各峰,测TNFα活性,得TNFα活性组分II。 TNFα活性组分I[Q-Sepharose FF离子柱]→[80 mmol/L NaCl]TNFα活性组分II CM-Sepharose FF离子交换柱层析 离子交换柱用pH为6的10mmol/L PB平衡,加TNFα活性组分II,再依次用该PB液、PB液加200mmol/L NaCl及PB液加600 mmol/L NaCl分步洗脱,收集各洗脱液,测TNFα活性,即得TNFα纯品(在4℃时,通过三次常压离子交换,电泳表明:PB液加600 mmol/L NaCl的洗脱峰为TNFα单一条带,可得TNFα纯品)。 TNFα活性组分II[CM-Sepharose FF离子柱]→[PB、200及600mmol/L NaCl]TNFα纯品 方法二、对合成的TNFα突变改造 突变改造 用多位点突变引物和PCR方法对合成的TNFα基因突变改造,使其第二位精氨酸密码子CGT变为赖氨酸密码子AAA,即得突变基因TNF-K2。 TNFα基因[多位点突变引物、PCR方法]→TNF-K2 转化、重组 将TNF-K2插入载体pSB-92的PL启动子下游,转化E.coliJM103,经酶切鉴定筛选转化子,得重组质粒pSB-TNF-K2。TNF-K2[pSB-92]→pSB-TNF-K2 培养、诱导 将pSB-TNF-K2于30℃培养至对数生长期,于42℃诱导4h,即得突变体[Lys2]TNFα,其分子量为17kD,比活性为6.8×107U/mg 蛋白,是一种可溶性蛋白质。 pSB-TNF-K2[30℃, 42℃, 4h]→[Lys2]TNFα. |
生产方法 |
由四氯荧光素碘化后用氯化钠盐析而得(参照荧光桃红)。
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用途 |
用作吸附指示剂、细胞染色剂
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用途 |
细菌染色剂;银量滴定法的吸附指示剂
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用途 |
主要用于抗肿瘤和抗病毒综合征的治疗。
不良反应:TNFα可能有发热、寒战、头痛、恶心、呕吐、食欲不振、全身倦怠、肌肉酸痛等;高剂量可导致休克、肾功能不全、白细胞及血小板减少和肝功能改变等。 |
用途 |
食用红色素。用于樱桃、鱼糕、海带鱼肉卷、香肠、糕饼、鱼松等,用量5~100mg/kg。
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